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干货:关于酶活检测那些事(一)

酶活性检测是我们常做的理化实验,广泛用于抗逆、生长发育、品种选育等研究,涵盖土壤、植物、动物、纳米材料等样品类型。

酶活性检测的方法通常有:

  1. 直接比色法。所用仪器为紫外-可见分光光度计和酶标仪,如SOD检测、POD检测等。
  2. 酶联免疫法(ELISA)。所用仪器为酶标仪。如植物蛋白酶检测。

上面两种方法的原理基本一致,即酶与底物作用后,反应开始进行,经过一定时间后,反应液会出现颜色的变化(生成有颜色的新化合物或反应液中有颜色的化合物被分解),反映为吸光度值(OD值)的变化。不同之处在于,酶联免疫法为间接测定,有抗体的加入发生酶联反应。

除此之外,还有其他方法。如固氮酶活性检测,其原理是固氮酶可以将乙炔还原成乙烯,通过测定还原后乙烯的量来反应酶活性,所用仪器为气相色谱仪(带FID检测器)。

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