1.简介 广泛靶向代谢组(Widely Targeted Metabolome):新一代靶向代谢组(Next Generation Metabolome)技术,广泛靶向代谢组检测技术是一种整合了非靶向和靶向检测技术优点的新型代谢组检测技术,具有高通量、高灵敏、广覆盖相对定量检测代谢物的技术优势,可以同时准确定性定量检测近千种(500-1000种)初生和次生代谢物,为解析代谢通路和生物学机理研究提供了重要基础。
物质类别,代表性物质
黄酮类
槲皮素、木犀草素、芹菜素、橙皮素、甘草素、黄芩素、高车前素、儿茶素等;
酚酸类
异绿原酸,香豆酸,阿魏酸,丹酚酸,丁香素,高香草酸,芥子酸,迷迭香酸,红景天苷,鼠尾草酸等;
生物碱
石斛碱、咖啡碱、麻黄碱、石蒜碱、苦参碱、甜菜碱、茶碱、葫芦巴碱等;
萜类
葫芦素、柴胡皂苷、酸枣仁皂苷、人参皂苷、三七皂苷、异黄芪皂苷、黄芪皂苷、积雪草苷、大豆皂苷等;
维生素类
泛酸、叶酸、维生素ABCDE等;
有机酸类
紫草酸、延胡索酸、甲基苹果酸、反式乌头酸、酒石酸、苹果酸等;
氨基酸类
苯丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺、L-苯丙氨酸、脯氨酸、瓜氨酸等;
糖及醇类
D-山梨糖醇、木糖醇、肌醇、D-甘露醇、阿拉伯糖醇、乳糖、麦芽四糖、果糖、蔗糖、葡萄糖等。
脂质
溶血磷脂酰乙醇胺、α-亚麻酸、亚油酸、花生四烯酸、肉豆蔻酸、棕榈油酸、月桂酸、单酰甘油酯等;
应用方向:
◆植物生长发育研究
◆植物逆境生物学研究
◆农作物农艺性状研究
◆药用植物活性成分鉴定
◆蔬果花卉营养色泽代谢研究
2. 技术优势:
◆定量准确:三重四级杆MRM模式,准确检测物质相对含量,
◆物质多、种类全:可与谱图比对,包括多种物质,涵盖多种类代谢物。
3.样品要求
1.取样建议
a. 叶片、茎、花等组织,取下后立即放入液氮中速冻2min以上,然后转移到-80℃保存,避免反复冻融。较大叶片需要用剪刀快速剪碎。
b. 地下组织(根、块茎等),将分离出的样本快速用灭菌水清洗,吸水纸吸走多余的水分后,立即放入液氮中速冻2min以上,然后转移到-80℃保存。块根等组织,需要切成 1-2cm 大小块状。
c. 果肉、果皮组织,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30min内)转移至室内,低温条件下将分离果皮或果肉切成 1-2cm 块状,立即放入液氮中速冻2min以上,然后转移到-80℃保存。
d. 细胞样本,取样后离心去除培养基,立即放入液氮中速冻2min以上,转移到-80℃保存。
2.混合取样
取样时为了保证样品的准确性和减少系统误差,每份样品选取 3 株以上长势一致的材料混样。以水稻叶片为例:取同一时期,表型基本一致的同一部位1片叶片,同时取6株,放入10ml离心管中,迅速放入液氮中。
3.样品量与生物重复
每份样品取鲜样不低于3g,干重不低于1g。
每组至少3个生物学重复,准备备份。
4.储存与运输
-80℃保存,足量干冰运输,避免反复冻融。