类胡萝卜素是一类重要的天然色素的总称。迄今,被发现的天然类胡萝卜素已达700多种, 根据化学结构的不同可以将其分为两类,一类是胡萝卜素(只含碳氢两种元素,不含氧元素,如B2胡萝卜素和番茄红素),另一类是叶黄素(有羟基、酮基、羧基、甲氧基等含氧官能团,如叶黄素和虾青素) 。类胡萝卜素常存在于绿色蔬菜、水果、豆荚、豆类的种子里。它还分布在肉类、蛋类、乳制品、水产品当中。
类胡萝卜素是人体维生素 A 的重要来源,具有抗氧化、免疫调节、抗癌、延缓衰老等重要作用,研究表明植物果实所含的类胡萝卜素的种类和含量与果实的颜色、营养品质密切相关。补充类胡萝卜素能防止“坏胆固醇”的氧化,保护血管内皮的完整,避免斑块和血管病变的产生。类胡萝卜素具有维生素A的营养作用,a-胡萝卜素、β -胡萝卜素、β-隐黄质在身体需要时可以转化成维生素A;抗氧化抗衰老作用,清除有害自由基,降低慢性疾病风险,包括癌症、心脑血管病、糖尿病等。
类胡萝卜素最常用的分析方法为高效液相色谱法及超高效液相色谱法,另外还可采用分光光度法,超临界流体色谱法,拉曼光谱法、液相色谱串联质谱法等进行分析。科米代谢采用高效液相色谱法准确地定量分析类胡萝卜素。
同时我们也对前处理条件优化。类胡萝卜素的前处理通常包括提取、皂化、液液萃取等步骤。类胡萝卜素特征的共轭双键结构对光、热、氧等都不稳定,因此前处理应避光进行,并加入抗坏血酸防止氧化。部分类胡萝卜素主要以脂肪酸酯的形式存在,难以定性,因此需进行皂化处理本。我们比较了皂化对实验结果的影响,表明通过皂化反应既可去除脂类物质的干扰,使基线降低,又可以使类胡萝卜素的脂肪酸酯转化成游离态的形式。
因此,一般类胡萝卜素检测,使试样经皂化后,类胡萝卜素从样品中以游离态的形式存在,用有机溶剂提取后定容过滤,用高效液相色谱分离,紫外检测器,外标法定量。整个前处理过程应注意避光。高效液相色谱法前处理简便快捷,准确度和灵敏度都能达到要求,适用于微量测定,分离时间较快。