一 流动相在液相色谱中扮演的角色
目标化合物在液相色谱中的保留取决于该物质与流动相和固定相间的作用强度。流动相是整个液相色谱分离过程中的“血液”，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争，因此流动相的选择直接影响组分的分离度。
二 流动相选择原则
1 适用性
用作流动相的溶剂应与固定相不相溶，并能保持色谱柱的稳定性。
2 纯度
流动相所用溶剂应有高纯度，以防流动相中的杂质在色谱柱上积累，致使柱性能下降。
3 检测背景值
如使用紫外检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收或吸收很小;当使用示差检测器时，应选择折射率与样品差别较大的溶剂作为流动相。
4 粘度与沸点
溶剂的粘度和沸点要适当。
使用低粘度溶剂可以减少溶质的传质阻力，有利于提高柱效，但如醚类等溶剂也不宜使用，因为粘度过低的溶剂容易在色谱柱或检测器内形成气泡，影响分离。而粘度高溶剂会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压升高，分离时间延长。
对于制备和纯化样品所用的流动相最好选用沸点较低的溶剂，这样易用蒸馏等方法把溶剂从柱后收集液中去除，有利于样品的纯化。
5 对样品的溶解度
如果流动相对样品的溶解度较差，样品会在色谱柱柱头沉积，导致柱效下降。
6 毒性
应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂，减少环境污染和确保实验人员的安全。
三 常用的流动相
反相色谱是大多数样品分析的分离模式，该模式的普适性更好、更方便、更容易获得令人满意的分离效果。在反相色谱中，一般使用非极性/弱极性键合固定相色谱柱，如C18柱、苯基柱等。
流动相的选择通常以水相(包括加入一定量的酸、碱、无机盐缓冲液等)做基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的如甲醇(质子给体)、乙腈(质子受体)、四氢呋喃(偶极溶剂)等极性溶剂，其极性及其K值(分配系数)和分离选择性有显著影响。
四 试剂纯度、高纯HPLC溶剂
溶剂的低含水量以及低固体微粒等特点有助于保护昂贵的液相色谱柱。
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